1. 원심 분리 법 (centrifugation)
ㅇ 용액 내 입자 크기, 밀도(비중) 차이를 이용하여, 성분 분리하는 방법
- 회전 원심력을 이용하여, 침강 속도를 인위적으로 증가시킴
ㅇ 원심 분리 원리
- 용액 내 입자에 작용하는 힘 (3개)
. 원심력 : (밖으로 밀어냄)
. 부력 : (유체에 의한 반대 방향 힘)
. 점성 저항력 : (이동 방해)
- 결과적으로
. 큰 입자 / 밀도 큰 입자 → 빠르게 침강
. 작은 입자 / 밀도 작은 입자 → 느리게 침강
ㅇ 원심력 표현 및 단위
- 원심력 (Centrifugal Force) : F = m a = m ω2r
. a = ω2r : 원심력 가속도 [㎠/s]
. ω : 각속도 [rad/s]
. r : 축에서 원심관의 중앙까지의 수평거리 [㎝]
- 상대 원심력 (RCF, Relative Centrifugal Force) : RCF = 1.118 x 10−5·r·(rpm)2
. 상대 원심력 : "지구 중력(g)의 몇 배인가?" → RCF = a / g = (ω2r) / g
. 1.118 x 10−5 : 상수
. rpm : 분당 회전수
ㅇ 주요 영향 인자
- 입자 크기 : (↑ → 침강속도 ↑)
- 밀도 차이 : (입자 vs 용매)
- 점도 : (↑ → 침강속도 ↓)
- 회전속도 : (rpm, RCF)
- 반경 : r
ㅇ 원심 분리기 유형
- 속도 기반 분류
. 저속 원심분리 (Low-speed)
. 고속 원심분리 (High-speed)
. 초 원심 분리 (Ultracentrifugation)
- 분리 방식 기반
. 차등 원심분리 (Differential centrifugation)
.. 크기 차이에 따라 단계적으로 침강
. 밀도 구배 원심분리 (Density Gradient centrifugation)
.. 밀도 차이에 따라 층별로 분리
.. 더 정밀한 분리 가능
ㅇ 응용 例)
- 혈액 성분 분리 : (혈장, 혈청, 적혈구, 백혈구)
- 세포 소기관 분리 : (세포핵, 미토콘드리아 등)
- 단백질, DNA 정제